根据麻疯树pepc基因和植物表达载体的酶切位点特征,分别将pepc基因全长序列3 000 bp正向插入pCAMBIA2300,构建了正义表达载体pCAMBIA-Jcpepc,基因片段597 bp反向插入pBI121构建了反义表达载体pBI-Jcpepc。通过农杆菌介导,采用叶盘法转化烟草,通过对转基因植株的PCR和PCR-Southern检测,表明pepc基因已经正向、反向插入烟草基因组中。测定了转基因烟草的PEPCase酶活性,并通过脂肪酸的测定,转正义pepc基因烟草叶片的脂肪酸含量平均比对照降低44.3%,转反义pepc基因植株脂肪酸含量平均比对照增加26.3%。

对采自不同产地和单株的牛奶子的果实性状、氨基酸含量、番茄红素、β2胡萝卜素、Vc以及微量元素进行了分析。牛奶子浆果平均鲜质量0. 13 g,变幅0. 07～0. 15 g。鲜果平均果肉率75. 01%。6个单株的17种氨基酸总含量在146. 596～179. 634 mg·g-1之间,平均总含量为167. 839 mg·g-1。其中谷氨酸含量最高,占氨基酸总含量的18.07%;其次精氨酸(11. 66% )及天冬氨酸含量(10. 78% ) ,甲硫氨酸最低(0. 84% ) ,其余氨基酸均在7. 00%以下。3个单株的番茄红素含量,最高的为342. 000 mg·kg-1 ,最低为78. 000 mg·kg-1 ,两者相差3. 38倍,其含量是番茄的2. 6～11. 4倍。β2胡萝卜素平均含量为6. 480 mg·kg-1 ,可溶性糖平均含量7. 312 mg·kg-1 ,可滴定酸平均含量3.240 mg· g-1。Vc 的平均含量为0. 049 mg· g-1。Fe、Mn、Zn、Cu 平均含量分别为97. 881、77. 553、23. 384、12. 129 mg·kg-1。K、Ca平均含量分别为11. 190、3. 720 mg·g-1。

采用GCMS法从‘克瑞墨大牡丹'鲜花挥发油中鉴定出香气化合物37种,可分为醇类、烯醇氧化物类、醛类、酯类、烯类、酸类、烷烃类和菲类化合物等8类,其中醇类物质含量最高,占挥发油总量的54.84%。香气的主体特征成分为芳樟醇、顺芳樟醇氧化物II、水杨酸甲酯、二十四烷、芳樟醇旋光异构体、α松油醇、壬醛等7种化合物,芳樟醇含量占挥发油总量的39.97%。

In this paper four species, C. chekiangoleosa, C. grijsi, C. octopetala and C. semiserrata with different cold hardiness were used to determine the electrolyte leakage and MDA content in their leaves after treated with different low temperatures ,1.5℃、-6.5℃、-16℃、- 22℃. Results showed that the plasma membrane permeability became much obviously with the fall of temperature. When the temperature is - 16℃,the electrolyte leakage of C. chekiangoleosa,C. grijsi , C. octopetala increased sharply to 1. 89,1. 33, and 1. 64 times more than that of the - 6.5℃. The electrolyte leakage of C. semiserrata was the most at - 6. 5℃, which was 87.1% more than that of the 1.5℃. MDA content changed regularly with the fall of temperature, raised at first and then declined. When the temperature is - 6.5℃, MDA content of C. semiserrata was the most ,which was 2.42 times of the control ; And when the temperature is - 16℃, MDA content of C. chekiangoleosa,C. grijsi,C. octopetala were the highest and were 75% ,1. 39 times and 1.02 times respectively more than that of the control .

以华仁杏6个杂交组合为实验材料,利用SSR分子标记技术研究亲本与杂种扩增谱带的多态性,以甄别真假杂种。筛选出在亲本和杂种之间存在双亲互补带型的引物6对,除2个杂种无法鉴别外,其余品种均可鉴别为真杂种。另外亲缘关系和遗传变异分析结果表明,各个组合杂交后代表现出来的一致性较高,遗传多样性水平相差不大,但当父本选择X1时,母本选择H1或H3杂交后代差异比较显著。

应用RT-PCR和RACE法从麻疯树总RNA中分离出pepc基因全长cDNA,长度为3 142 bp,阅读框2 898 bp,编码965个氨基酸,在GenBank中登录,序列号为EU069413。它的氨基酸序列与蓖麻、陆地棉、橙、大豆、花生、烟草、油菜、拟南芥的氨基酸同源性分别为94.94%、92.46%、90.60%、90.50%、90.50%、88.33%、84.61%、82.44%。该基因编码了pepc基因家族中的pepc1,蛋白属于C3型PEPC。推测了pepc编码蛋白分子量为110.6 kD,并对其稳定性、二级结构、疏水性等特性进行了分析,最后确定了该蛋白的功能位点和结构域。

Agrobacteriurn tumefaciens-mediated transformation (AtMT) method was used to study the genetic transformation in Rhizopus arrhizus of antisense expression vector pBI121-fad2 of VeFAD2 gene. We studied the key factors influencing transformation, such as A.tumefaciens strains,bacterial cell volume initially used, co-cultivation time, effective period and concentration of AS. The results shows that the ideal A.tumefaciens strain is AGL-1, the optimum bacterial cell volume initially used is 50-100 μL and co-culture 24 hours will get the most transformants. At co-culture period, AS induction is indispensable. It is beneficial to improve transformation ratio by adding to 200 μmol·L-1 AS at preincubate period and increasing AS concentration to 400-600 μmol·L-1 at co-culture period. It determined that antisense VeFAD2 gene has been integrated into the genome of R. arrhizus by PCR-Southern detection.

目的 揭示无距虾脊兰种子无菌萌发过程的形态特征和组织结构特点，为无距虾脊兰保育和离体快速繁殖提供参考依据。 方法 以浙江天目山无距虾脊兰野生居群为材料，采收其果实进行无菌萌发实验。通过形态观察和石蜡切片法，对种子萌发到幼苗初步形成过程进行细胞组织学研究，并对发育阶段进行划分。 结果 无距虾脊兰种子萌发的适宜基本培养基为VW培养基，椰子水对萌发具有促进作用，而香蕉泥对萌发具有抑制作用，在授粉后胚龄为4个月左右采收进行播种，萌发率最高。依据对其萌发过程中种胚膨胀、顶端分生组织的出现和发育、叶和根的分化等突出性状的观察，将无距虾脊兰种子萌发过程分为4个阶段。 结论 无距虾脊兰的种子无菌萌发过程主要由种胚吸水膨胀，原球茎的形成和分化2个生物学过程组成，其中，顶端分生组织、叶绿体和维管束为原球茎生长和发育过程中的重要结构。

以杂交鹅掌楸的叶片、叶柄、无菌苗的茎段及其芽基部切段为外植体,进行愈伤组织途径的器官发生及不定芽途径的直接器官发生培养。结果表明,多种外植体在诱导培养基上均能脱分化产生愈伤组织,其中无菌苗芽基部具有最高的愈伤组织诱导率。愈伤组织在MS+6-BA 2.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1和MS+6-BA 4.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1的分化培养基上能分化出不定芽。部分外植体在MS+6-BA 4.0 mg.L-1+NAA 0.5 mg.L-1的分化培养基上直接分化产生不定芽。器官发生途径再生体系的建立为抗逆基因工程等工作奠定了基础。

研究了卡那霉素、潮霉素对浙江红山茶、大花红花油茶愈伤组织的生长及对攸县油茶幼苗叶片诱导愈伤的影响,确定作为选择压力的卡那霉素质量浓度为50～60mg·L-1,潮霉素为25～30mg·L-1。在3种抑菌性抗生素中,羧苄青霉素促进愈伤组织诱导,对愈伤组织的生长没有影响,头孢霉素则有抑制作用,而羟氨苄青霉素轻微抑制愈伤组织的生长,但对愈伤组织的诱导影响不大。考虑到抑菌效果,适于在转基因研究中使用的羧苄青霉素的抑菌质量浓度为250mg·L-1,羟氨苄青霉素为125mg·L-1。